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医院耳鼻咽喉头颈外科
上海医院耳鼻咽喉头颈外科
上海交通大学耳鼻咽喉科研究所
01
材料与方法
1
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实验动物和分组
健康成年南美栗鼠18只，雌雄不限，9-12月龄，体重~g,由牡丹江枫丹毛丝鼠养殖有限公司提供。
动物人组前均通过耳廓反射检查和耳镜检查，随机数字表法分为3组,每组6只。
2
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制备卡铂耳蜗损伤模型
卡铂于临用前溶于5%葡萄糖溶液，单次注射剂量为76mg/kg。
为防止药物反应造成动物死亡，注射后密切观察动物状态及饮食情况，并连续3d于背部皮下注射0.9%生理盐水10ml。
3
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圆窗电极安放和CAP测定
测试给声为开放式自由声场,FT-28宽频扬声器置于距动物头部前方10cm处，刺激声发放频率为19次/s。
刺激信号的产生与诱发电位的记录和处理均由TDT系统完成。
4
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取材铺片
CAP测试结束后，动物在麻醉状态下迅速取出听泡，修剪听泡周用多余的骨质以充分暴露鼓室内壁。
再用分离针从鼓阶沿者蜗轴的骨性螺旋板分离并分段取下全耳蜗基底膜。
5
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毛细胞数据采集
耳蜗铺片样品在高分辨率显微镜下观察,A组动物选取铺片完整的基底膜计量基底膜长度。
选取铺片完整、无毛细胞机械损伤且毛细胞染色清楚的基底膜进行毛细胞计数,B.C组动物则对全部耳蜗样品进行分析。
6
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统计学处理
分析各排毛细胞在基底膜上的分布特点时采用方差分析。
本研究与其他研究南美栗鼠基底膜长度的差异分析采用双样本l检验;以P0.05为差异有统计学意义。
02
结果
1
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健康成年南美栗鼠CAP阈值
click和2、4、8kHz短纯音诱发的CAP反应阈较低。
而0.5、1和16kHz短纯音诱发的CAP反应阈略高于其他频率短纯音。
2
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毛细胞参数及分布特点
其中3排外毛细胞间数量差异无统计学意义;单位长度内每排外毛细胞的数量均显著多于内毛细胞,差异有统计学意义。
基底膜自顶回至底回每相邻10%基底膜长度内耳蜗毛细胞数量如表所示。
3
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损害程度及CAP变化
两次相同剂量卡铂造成的内毛细胞损害程度并非只是简单相加。
经历过一次卡铂损害后残存的内毛细胞对第二次卡铂的攻击表现得更加敏感也更脆弱。
03
讨论
本研究获得了成年南美栗鼠平均耳蜗CAP阈值和全耳蜗基底膜单位百分比长度内、外毛细胞密度、分布特点、耳蜗基底膜长度及内、外毛细胞总数等重要电生理和解剖学数据。
其中毛细胞总数数据在以往的研究中未见报道。
以上述二种手段，通过卡铂耳蜗损伤模型，证明了不同程度耳蜗内毛细胞损害与CAP阈移及振幅改变有着良好的对应关系。
温馨提示
本
